④將水樣裝入兩個(gè)溶解氧瓶內(nèi)，測定當(dāng)天溶解氧和培養(yǎng)5天后的溶解氧。
⑤稀釋水同樣培養(yǎng)作空白實(shí)驗(yàn)，測定5天前后的溶解氧。
4、注意事項(xiàng)
(1)水樣pH值應(yīng)在6.5—7.5范圍內(nèi),若超出可用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH近于7。
(2)水樣在采集和保存及操作過程中不要出現(xiàn)氣泡
(3)水樣稀釋倍數(shù)超過100時(shí),要預(yù)先在容量瓶中用蒸餾水稀釋,再取適量進(jìn)行稀釋培養(yǎng)。
(4)檢查稀釋水和接種液的質(zhì)量和化驗(yàn)人員的水平,可將20ml葡萄糖—谷氨酸標(biāo)液用稀釋水稀至1000ml,按BOD的步驟操作,測得的值應(yīng)在180—230mg/L之間,否則,應(yīng)找出原因所在。
(5)在培養(yǎng)過程中注意及時(shí)添加封口水。
04
溶解氧的測定
溶解在水中的分子態(tài)氧稱為溶解氧。溶解氧的飽和含量和空氣中氧的分壓、大氣壓力、水溫有密切關(guān)系。清潔地面水溶解氧一般接近飽和，廢水中的溶解氧含量一般較低。
1、方法選擇
測定水中溶解氧常用碘量法及其修正法，還可用溶解氧儀測定。氧化性物質(zhì)可使碘化物游離出碘，產(chǎn)生正干擾;還原性物質(zhì)可把碘還原成碘化物，產(chǎn)生負(fù)干擾。大部分受污染的地面水和工業(yè)廢水采用修正的碘量法和電極法。
2、水樣的采集與保存
水樣應(yīng)采集在溶解氧瓶中，過程中不要有氣泡產(chǎn)生，沿瓶壁直接傾注水樣至溢流出瓶容積1/3—1/2左右，采集后，在取樣現(xiàn)場立即固定并存于暗處。
碘量法:
1、原理
水樣中加入硫酸錳和堿性碘化鉀，水中的溶解氧將低價(jià)錳氧化成高價(jià)錳，生成四價(jià)錳的氫氧化物沉淀。加酸后，氫氧化物沉淀溶解并于碘離子反應(yīng)而釋放出碘。以淀粉作指示劑，用硫代硫酸鈉滴定碘，可計(jì)算溶解氧的含量。
2、儀器：
250—300ml溶解氧瓶
試劑：
(1)硫酸錳溶液：
稱取240g硫酸錳(MnSO4˙4H2O或182gMnSO4˙H2O)溶于水，稀至500ml。
(2)堿性碘化鉀溶液
稱取250g氫氧化鈉溶于200ml水中;稱取75g碘化鉀溶于100ml水中，待氫氧化鈉冷卻后，將兩溶液混合,稀至500ml。
如有沉淀,則放置過夜,傾出上清夜,貯于棕色瓶中，用橡膠塞塞緊，避光保存。
(3)1+5的硫酸溶液：1份硫酸加上5份水。
(4)1%的淀粉溶液:
稱取1g可溶性淀粉，用少量水調(diào)成糊狀,用剛煮沸的水沖稀至100ml。冷卻后,加入0.4g氯化鋅防腐。
(5)0.02500mol/L(1/6K2Cr2O7)
稱取于105--110℃烘干2h并冷卻的重鉻酸鉀1.2258g,溶于水，移入1000ml的容量瓶中，稀至標(biāo)線，混勻。
(6)硫代硫酸鈉溶液
稱取6.2g的硫代硫酸鈉(Na2S2O3˙5H2O)溶于煮沸放冷的水中,用
水稀至1000,貯于棕色瓶中。用前用0.02500mol/L的重鉻酸鉀標(biāo)定，方法如下：
于250ml碘量瓶中,加入100ml水和1g碘化鉀,加入10.00ml 0.02500mol/L重鉻酸鉀標(biāo)液,5ml 1+5的硫酸溶液密塞,搖勻。暗出靜置5分鐘后，用硫代硫酸鈉滴定至溶液呈淡黃色，加入1ml淀粉溶液,繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛好褪去。記錄用量
(7)濃硫酸
3、實(shí)驗(yàn)步驟
(1) 溶解氧的固定(取樣現(xiàn)場固定)
①用吸管插入液面下，加入1ml硫酸錳、2ml堿性碘化鉀;
②蓋好瓶蓋,顛倒混合數(shù)次，靜置。
③待沉淀物降至瓶內(nèi)一半，再顛倒混合一次，待沉淀物降到瓶底。
(2) 析出碘
輕輕打開瓶塞,立即將吸管插入液面下加入2.0ml濃硫酸，,蓋好瓶塞，顛倒混合，至沉淀物全部溶解,暗處放置5分鐘。
(3) 滴定
吸取100.0ml上述溶液于250ml錐形瓶中,用硫代硫酸鈉滴定至淡黃色，加入1ml淀粉溶液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛好褪去既為終點(diǎn)，記錄用量。
疊氮化鈉修正(碘量)法:
1、概述
水中含有亞硝酸鹽時(shí)干擾碘量法測溶解氧，可加入疊氮化鈉，使水中亞硝酸鹽分解，以消除干擾。在不含其他氧化還原物質(zhì)時(shí)，若水樣中含F(xiàn)e3+ 達(dá)100—200mg/L時(shí)，可加入1ml40%氟化鉀溶液，以消除干擾。
2、試劑:
(1)堿性碘化鉀—疊氮化鈉溶液： 稱取250g氫氧化鈉溶于200ml水中;稱取75g碘化鉀溶于100ml水中，溶解5g疊氮化鈉于20ml水中，待氫氧化鈉冷卻后，將三溶液混合，稀至500ml。貯于棕色瓶中，用橡膠塞塞緊，避光保存。
(2)40%(m/v)氟化鉀:稱取40g氟化鉀(KF˙2H2O)溶于水，稀至100ml,貯于聚乙烯瓶中。
(3)實(shí)驗(yàn)步驟同碘量法。僅將堿性碘化鉀換成堿性碘化鉀—疊氮化鈉溶液。若含F(xiàn)e3+干擾，則插入液面下先加入1ml40%氟化鉀溶液。
注意事項(xiàng)：
(1)疊氮化鈉是一種劇毒、易爆試劑，不能將堿性碘化鉀—疊氮化鈉溶液直接酸化，否則產(chǎn)生有毒煙霧。
(2)水樣呈強(qiáng)酸或強(qiáng)堿性，可用氫氧化鈉或硫酸調(diào)至中性。
(3)在操作過程中切勿產(chǎn)生氣泡。
(4)硫代硫酸鈉濃度容易變化，每次使用都要標(biāo)定。